Получение эритроцитов

Для эритроцитов используются эритроциты барана. Кровь берут из яремной вены в стерильную банку с бусами. Дефибринированная кровь может храниться 1 нед. при 4 °С. Лучше всего брать кровь в банку с раствором Альсевера, в котором эритроциты сохраняются до 1—2 мес. Перед постановкой РСК эритроциты трижды отмывают изотоническим раствором хлорида натрия путем центрифугирования при 1000—2000 об/мин в течение 5—10 мин соответственно. После последнего центрифугирования надосадочная жидкость должна быть прозрачной. Красный цвет жидкости (гемолиз) свидетельствует о непригодности эритроцитов к употреблению.

Гемолиз зависит от качества эритроцитов и изотонического раствора хлорида натрия. Отмытые эритроциты хранят, как правило, не более 2 сут. Обычно в РСК используют 3—5 % суспензию эритроцитов. При капельном методе из - осадка отмытых эритроцитов готовят 1 % взвесь на рабочем растворе буфера. Гемолитическая сыворотка. Ее получают от кроликов, иммунизированных эритроцитами барана. В настоящее время берут сухую стандартную гемолитическую сыворотку, которую разводят согласно инструкции. Обычно в РСК используют гемолитическую сыворотку в 3-кратном титре. При капельном методе ее применяют в 5-кратном титре. Например, если титр сыворотки 1 : 1500, ее разводят буферным раствором 1 : 300 (0,1 мл сыворотки и 29,9 мл раствора).